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Identification of stem cells that maintain and regenerate lingual keratinized epithelial cells. Toshihiro Tanaka, Yoshihiro Komai, Yoko Tokuyama, Hirotsugu Yanai, Shuichi Ohe, Kazuichi Okazaki, Hiroo Ueno Nature Cell Biology , 15 , 511-518 (2013) 1．舌の上皮組織における既知の幹細胞マーカーの発現と細胞系譜の解析. 舌の上皮組織における既知の幹細胞マーカーの発現を免疫染色により調べた．サイトケラチン14およびサイトケラチン5は糸状乳頭のあいだのくぼみに発現が多く上層に移動するにしたがい発現は低下したが，合計ではおよそ1/3がこれらマーカーを発現していた．この結果は，過去の報告と矛盾しないものであり 1) ，糸状乳頭のあいだのくぼみに舌の上皮前駆細胞が存在していることを示唆した．しかし，細胞増殖のマーカーであるKi67染色にて，分裂している細胞は舌の上皮組織の最下層の基底細胞のみであり，サイトケラチン14陽性細胞のうち上皮組織を供給している分裂細胞はごく一部であることが示された．この結果より，サイトケラチン14およびサイトケラチン5は幹細胞のマーカーとしては特異性の低いことが示唆された．ただし，過去の報告より，ほかの臓器の幹細胞ではさかんに分裂し組織細胞を供給している短期前駆細胞と，増殖の遅い長期幹細胞とが併存して役割分担している例が知られており，必ずしも分裂している細胞が幹細胞とはかぎらないことが知られている． そこで，舌の上皮組織の基底細胞のうち，どの細胞が真の長期幹細胞であるかを調べるため，筆者らの開発した多色細胞系譜追跡法 2-4) を用いて，舌の上皮組織を長期間にわたり維持可能である幹細胞の解析を試みた 5-7) ．多色細胞系譜追跡法では，従来の方法 8) に比べ，ある細胞集団に存在する長期幹細胞のクローン数を予測すること，また，異なった幹細胞に由来するクローンを区別することが容易になっている 2,3) ．Rosa26 rbw/+ マウスはCreリコンビナーゼによるDNA組換えが起こると，緑色（GFP）を発現していた細胞が青色（mCerulean），オレンジ色（mOrange），赤色（mCherry）にランダムに変化する．全身のすべての細胞においてタモキシフェンの投与によりCreリコンビナーゼを発現させることのできるマウスとRosa26 rbw/+ マウスとを掛け合わせ，タモキシフェンの投与により成体の舌の上皮組織すべての細胞をランダムな3色にて標識した．その結果，投与から7日目および14日目までは多数の細胞が基底層から上層の方向へと増殖しているようすが観察され，基底細胞が分裂し分化した上皮細胞を供給しているという過去の報告と合致する結果であった 9) ．しかし，1カ月後には糸状乳頭のあいだのくぼみを中心とした区画ごとにそれぞれ単色となり，ほぼ1個の長期幹細胞がその区画のすべての上皮組織を維持していることが明らかになった．この結果から，舌の上皮組織の基底細胞のうち，ごく一部（事実上，1個）が長期幹細胞であることが示された． 舌の上皮組織を維持する真の長期幹細胞を同定するため，種々の幹細胞マーカー遺伝子にCreリコンビナーゼの遺伝子をノックインしたマウスによる上皮組織の標識を試みた．幹細胞マーカー遺伝子のうち， villin 遺伝子， shh 遺伝子， Lgr5 遺伝子を用いた細胞系譜の追跡では成体の舌の上皮組織の標識はまったく認められなかった．しかし，Creリコンビナーゼの遺伝子を Bmi1 遺伝子にノックインしたマウス 10) を用いたところ，舌の上皮組織の標識が認められた． Creリコンビナーゼ遺伝子を Bmi1 遺伝子にノックインしたマウスとRosa26 rbw/+ マウスを掛け合わせたマウスにおいて，タモキシフェンの投与によりCreリコンビナーゼを発現させたのち2日目に単一の標識細胞が確認され，約2週間までに標識された幹細胞に由来する細胞集団が角化層にまで到達した．Bmi1陽性細胞から供給された範囲は4週間で単一色の細胞集団によりうめつくされた．そののち6カ月以上にわたり蛍光標識された細胞は維持され，上皮組織を供給しつづけていることが観察された．これらの結果から，Bmi1陽性細胞は舌の上皮組織を維持する長期幹細胞であることが証明された．また，基底細胞はKi67陽性細胞でありさかんに分裂していることと比較すると，標識されたBmi1陽性細胞は7日目ごろまで分裂せず，そののち，分裂をはじめたことは，この細胞が基本的に増殖の遅い幹細胞であることを示した． 2．Bmi1陽性細胞の存在する位置, インカジ 掲示板. in situ ハイブリダイゼーション法により，Bmi1陽性細胞は糸状乳頭のあいだのくぼみの底部に存在しており，1つのくぼみのなかに基本的に最大でも1個のBmi1陽性細胞が認められた．また，Creリコンビナーゼ遺伝子を Bmi1 遺伝子にノックインしたマウスとRosa26 rbw/+ マウスを掛け合わせたマウスにおいて，タモキシフェンの投与によりCreリコンビナーゼを発現させたのち2日目に認められたBmi1陽性細胞に由来する細胞の位置と， in situ ハイブリダイゼーション法により観察されたBmi1陽性細胞の位置は基本的に合致していた．舌における位置とBmi1陽性細胞の位置に相関はなかった． in situ ハイブリダイゼーション法により，ほとんどの糸状乳頭のあいだのくぼみにBmi1陽性細胞が認められたにもかかわらず，Creリコンビナーゼ遺伝子を Bmi1 遺伝子にノックインしたマウスとRosa26 rbw/+ マウスを掛け合わせたマウスにおいて標識された細胞は，一部では Bmi1 遺伝子プロモーターによるCreリコンビナーゼ遺伝子の発現が多くないため，この系において閾値に達しない細胞が多く存在したと思われた． Bmi1陽性細胞は糸状乳頭のあいだのくぼみにおいて，もっとも下層ではなく，それよりやや上段に存在することが大部分であり，約50％が基底層から2～3個目の位置であった．水平断では，糸状乳頭は例外もあるが三角格子状にそって配置されていた．3つの糸状乳頭にかこまれた領域の中央にはくぼみがあり，そのなかにBmi1陽性幹細胞が存在した．タモキシフェンの投与ののち12週間の3次元画像において，1個のBmi1陽性幹細胞が維持する上皮組織の領域を解析した．1個のBmi1陽性細胞からの供給される細胞集団は糸状乳頭のあいだのくぼみ全体をしめ，それに由来する角化上皮細胞はくぼみの周囲に位置する3個（より少ない頻度では，4個）の糸状乳頭に及んでいた（図1）．Creリコンビナーゼ遺伝子を Bmi1 遺伝子にノックインしたマウスとRosa26 rbw/+ マウスを掛け合わせたマウスを用いた場合，タモキシフェンを1回投与しただけでは一部の上皮細胞しか標識されなかったが，3回異なるタイミングで投与するとその頻度は非常に上昇した．興味深いことに，このように標識細胞の頻度を増加させた条件でもこのマウスにおいて味蕾細胞が標識されることはなかった．つまり，Bmi1陽性幹細胞は角化上皮細胞のみを維持しており，味蕾細胞を維持していないことがわかった． 入金方法 ; ライトコイン, 0. 01 LTC, 上限なし ; イーサリアム, 0. 01 ETH, 上限なし ; テザー, 0. 0001 USDT, 上限なし ; ドージコイン, 1 DOGE, 上限なし. ビット コイン カジノ ボーナスとプロモーション. ビット コイン と は K888VIP. 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